PRÁCTICA 35: WAALER ROSE.

• OBJETIVOS:

Determinación cualitativa de Factores Reumatoides (FR).

• FUNDAMENTOS:

Técnica de hemaglutinación para la detección cualitativa y semicuantitaivade FR en suero humano. Los hematíes estabilizados de oveja y sensibilizados con IgG de conejo anti-hematíe de oveja, son aglutinados por FR presentes en la mujestra del paciente.

• MATERIALES:

- Micropipetas 50 y 20µl.
- Puntas de pipeta.
- Agua destilada.
- Tarjetas.

• REACTIVOS:

- Waaler Rose.
-  Control +
- Control -

• PROCEDIMIENTO:

-> Método cualitativo:
- Atemperar reactivos.
- Depositar  50µl de la muestra a ensayar y una gota de cda uno de los controles + y - en los distintos círculos de las tarjetas.
- Homogeneizar el reactivo WR antes de usar. Depositar una gota 20 µl de dicho reactivo en cada uno de los círculos anteriores.
- Mezclar las gotas con un palillo.
- Situar las tarjetas sobre el agitador durante 8'.

-> Método semicuantitativo:
- Realizar diluciones dobles de la muestra en agua destilada.
- Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.

• RESULTADO:

 -> Método cualitativo:
-

• FOTOGRAFÍAS: 
• 

PRÁCTICA 34: ASO-LÁTEX.

• OBJETIVOS:

Determinación cualitativa de anti-estreptolisina O (ASO).

• FUNDAMENTOS:

La estreptolisina O es un exoenzima inmunogénico tóxico producido por estreptococos  β-hemolíticos de los grupos A,C y G. La cuantificación de los anticuerpos ASO se utiliza para el diagnóstico y tratamiento de enfermedades como las fiebres reumáticas, glomerulonefritis aguda, y otras infecciones estreptocócicas.

• MATERIALES:

- Micropipetas 50 y 20µl.
- Puntas de pipeta.
- Agua destilada.
- Tarjetas.

• REACTIVOS:

- Látex.
-  Control +
- Control -

• PROCEDIMIENTO:

-> Método cualitativo:
- Atemperar reactivos.
- Depositar  50µl de la muestra a ensayar y una gota de cda uno de los controles + y - en los distintos ccírculos de las tarjetas.
- Homogeneizar el reactivo ASO-látex antes de usar. Depositar una gota 20 µl de dicho reactivo en cada uno de los círculos anteriores.
- Mezclar las gotas con un palillo.
- Situar las tarjetas sobre el agitador durante 8'.

-> Método semicuantitativo:
- Realizar diluciones dobles de la muestra en agua destilada.
- Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.

• RESULTADO:

 -> Método cualitativo:
+
-> Método semicuantitativo:
Título:

• OBSERVACIONES:

Aunque en el método cualitativo da +, al realizar el método semicuantitativo no hemos obtenido título en las dilucines preparadas.

• FOTOGRAFÍAS:
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  

PRÁCTICA 33: PCR-LÁTEX

• OBJETIVOS:

Determinación cualitativa de Proteína C-Reactiva

• FUNDAMENTOS:

La proteina C-reactiva es una proteina de fase aguda, presente en el suero de pacientes sanos, la cual puede incrementarse en la mayoría de procesos infecciosos bacterianos y virales.

• MATERIALES:

 - Micropipetas 50 y 20µl.
- Puntas de pipeta.
- Agua destilada.
- Tarjetas.

• REACTIVOS:
• 

- Látex.
-  Control +
- Control -

• PROCEDIMIENTO:

-> Método cualitativo:
- Atemperar reactivos.
- Depositar  50µl de la muestra a ensayar y una gota de cda uno de los controles + y - en los distintos ccírculos de las tarjetas.
- Homogeneizar el reactivo PCR-látex antes de usar. Depositar una gota 20 µl de dicho reactivo en cada uno de los círculos anteriores.
- Mezclar las gotas con un palillo.
- Situar las tarjetas sobre el agitador durante 8'.

-> Método semicuantitativo:
- Realizar diluciones dobles de la muestra en agua destilada.
- Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.

• RESULTADO:

 -> Método cualitativo:
+
-> Método semicuantitativo:
Título: 1:4

• FOTOGRAFÍAS:
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  

PRÁCTICA 32: FR- LÁTEX

• OBJETIVOS:

Determinación cualitativa de Factores Reumatoides  (FR).

• FUNDAMENTOS:

Es una técnica de aglutinación para la detección cualitativa y semicuantitativa de factores reumatoides (FR) en suero humano. Las partículas de látex recubiertas con gamma-globulina humana son aglutinadas por factores reumatoides (grupo de Acs dirigidos contra la fracción Fc de las inmunoglobulinas G) presentes en la muesra del paciente.

• MATERIALES:

- Micropipetas 50 y 20µl.
- Puntas de pipeta.
- Agua destilada.
- Tarjetas.

• REACTIVOS:

- Látex.
-  Control +
- Control -

• PROCEDIMIENTO:

-> Método cualitativo:
- Atemperar reactivos.
- Depositar  50µl de la muestra a ensayar y una gota de cda uno de los controles + y - en los distintos ccírculos de las tarjetas.
- Homogeneizar el reactivo FR-látex antes de usar. Depositar una gota 20 µl de dicho reactivo en cada uno de los círculos anteriores.
- Mezclar las gotas con un palillo.
- Situar las tarjetas sobre el agitador durante 8'.

-> Método semicuantitativo:
- Realizar diluciones dobles de la muestra en agua destilada.
- Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.

• RESULTADO:

 -> Método cualitativo:
+
-> Método semicuantitativo:
Título: 1:4

• FOTOGRAFÍAS:

 

PRÁCTICA 31: DETERMINACIÓN EN ORINA DE HCG.

• OBJETIVOS:

Determinar la presencia o ausencia de HCG en orina.

• FUNDAMENTOS:

Inmunocromatografía coloreada.

• PROCEDIMIENTO:

Depositar una gota de orina en la ventanilla y esperar unos minutos para observar los resultados.

• RESULTADOS:

Coloración ventanillas T y C -> Presencia de HCG en orina.

• FOTOGRAFÍAS:
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  

PRÁCTICA 30: RPR-CARBÓN

• OBJETIVOS:

Determinación cuali y semicuantitativa de reaginas pasmáticas IVD.

• FUNDAMENTOS:

Es una técnica no treponémica de aglutinación en porta para la detección de reaginas plasmáticas en suero humano. Las partículas de carbón sensibilizadas con una mezcla de lípidos, son aglutinadas en presencia de reaginas (grupo de Ac dirigidos contra componentes del propio organismo, originadas en pacientes que sufren infección por Treponema pallidum, agente causal de la sífilis) presentes en la muestra del paciente afectado por sífilis.

• APARATAJE:

- Agitador automático rotatorio.

• MATERIALES:

- Micropipeta 50µl.
- Puntas de pipeta.
- Agua destilada.
- Tarjetas.

• REACTIVOS: 

- RPR-carbón.
- Control +.
- Control -.

• PROCEDIMINETO:

  -> Método cualitativo:
- Atemperar reactivos.
- Depositar  50µl de la muestra a ensayar y una gota de cda uno de los controles + y - en los distintos ccírculos de las tarjetas.
- Homogeneizar el reactivo RPR antes de usar. Depositar una gota 20 µl de dicho reactivo en cada uno de los círculos anteriores.
- Mezclar las gotas con un palillo.
- Situar las tarjetas sobre el agitador durante 8'.

-> Método semicuantitativo:
- Realizar diluciones dobles de la muestra en agua destilada.
- Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.

• RESULTADOS:

-> Método cualitativo:
+
-> Método semicuantitativo:
Título: 1:4

• FOTOGRAFÍAS:

 

PRÁCTICA 29: SEROLOGÍA. HEMOAGLUTINACIÓN INDIRECTA. TOXOPLASMOSIS.

• OBJETIVOS:

Determinar cuantitativamente los anticuerpos séricos dirigidos contra Toxoplasma gondii por hemoaglutinación indirecta.

• FUNDAMENTOS:

Se basa en el principio de hemoaglutinación indirecta. Esta técnica permite detectar ás IgG y las IgM anti-toxoplasmáticas. Es posible diferenciarlas tratando el suero con 2-mercaptoetanol el cual inhibe el poder aglutinante de las IgM.
La presencia de Ac anti-Toxoplasma Gondii séricos provoca una aglutinación de los hematíes sensibilizados que se traduce en un velo rojo/marrón que tapiza el pocillo. En ausencia de anticuerpos específicos, estos hematíes se sedimentan en el fondo del pocillo con un anillo.
Los hematíes no sensibilizados aseguran la especificidad de la reacción y permiten eliminar las interferencias debidas a las aglutininas naturales anti-ovino (heteroanticuerpos ).

• MATERIAL:

- Micropipeta 50µl.
- Puntas de pipeta.
- Microplaca de fondo U.
- Tubo de ensayo.

• REACTIVOS:

- Hematíes sensibilizados (Tapón rojo).
- Hematíes no sensibilizados (Tapón verde).
- Control positivo.
- Control negativo.
- Tampón fosfato pH 7,2.

• MUESTRA:

- Suero.

• PROCEDIMIENTO:

- Preparar una dilución madre de suero a analizar.
Distribuir en un tubo:
50µl de suero.
1950µl de tampón fosfato.
- Preparar batería de dilución, suero control, reactivo control, C+ y C- con las siguientes cantidades:

•  RESULTADOS:

Cuando se ealiza la titulación del suero del paciente por aglutinación en ausencia de 2-ME y se informa un título, en realidad se está informando una actividad aglutinante que e sla suma de la actividad aglutinante de la IgM y de la IgG.
TÍTULO -> 1:80
Si siguiendo el protocolo provisto por el fabricante, se realiza la técnica en presencia de 2-ME se produce una reducción de la IgM. El título que se obtiene al realizar la técnica de aglutinación en presencia de 2-ME corresponderá exclusivammente a la actividad aglutinante de la IgG.
- Si disminuye el títilo al menos 2 diluciones -> mido Ig M
- Si disminuye -> mido Ig G 

FOTOGRAFÍAS: