PRÁCTICA 6: TINCIÓN DE ZIEHL-NEELSEN  Y GRAM.


OBJETIVO Y FUNDAMENTO:

Diferencia entre bacilos ácido-alcohol resistentes(BAAR) bacterias que presentan una pared celular muy rica en ácidos grasos de cadena larga, denominados ácidos micólicos, que la hacen resistente a la decoloración con alcohol ácido, una vez que han sido  teñidas con colorantes básicos, y bacilos no ácido-alcohol resistentes.

APARATAJE:

-Microscopio.

MATERIALES:

-Asa de siembra desechable.
- Mechero de alcohol.
- Portaobjetos.
- Pinzas de madera.
- Agua destilada.
- SSF.
- Gradillas.
- Cubeta de tinción.
- Papel de filtro.
- Antorcha (asa de siembra y algodón graso + alcohol).
- Colorantes de Ziehl ( Fucsina fenicada, alcohol ácido y azul de metileno).

PROCEDIMIENTO: 

1.EXTENSIÓN ->  en primer lugar ponemos una gota de SSF en el porta, cogemos colonia de la placa Petri y frotamos en el porta.
2. DESECACIÓN -> con ayuda del mechero de alcohol secamos muy bien la preparación del portaobbjetos.
3. FIJACIÓN -> flameamos varias veces el portaobjetos.
4. TINCIÓN -> 1'en frío de fucsina fenicada (colorante básico) y 5' a emisión de vapores( se consigue calentando la parte inferior del porta(con el papel de filttro cubriendo la preparación) con la antorcha fabricada ), y lavamos con agua del grifo una vez enfriado, 30 '' con alcohol ácido (decolorante) y lavamos con agua destilada y finalmente 1' azul de metileno(colorante de contraste)  y lavamos con agua destilada.

RESULTADO:

-M. phlei -> BAAR (+) bacilo fino rojo .
- Proteus -> BAAR (-) bacilo corto azul.

OBSERVACIONES:

Los microorganismos no se han teñido correctamente por causa desconocida.

FOTOGRAFÍAS:

Aquí dejo la foto de un compañero del resultados que deberíamos haber obtenido:

PRÁCTICA 6.1: TINCIÓN DE GRAM.

Nota:
Práctica explicada en la práctica 5.

RESULTADOS:

- Bacillus sp -> Gram (+)
- Citrobacterium -> Gram (-)

- Bacillus sp -> Gram (+)
- Citrobacterium -> Gram (-)

OBSERVACIONES:

El citrobacterium Gram (-) no ha cogido bien el colorante.