MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA 7: TINCIÓN DE WIRTZ.

OBJETIVO Y FUNDAMENTO:

Consiste en la tinción de esporas que son formas de resistencia que se forman en el interior del citoplasma de algunas bacterias.
La pared de las esporas es bastante impermeable por lo que cuesta trabajo teñirlas (se fuerza la coloración mediante calor), pero una vez teñidas, tras la decoloración perderá el color toda la bacteria excepto las esporas.
El tamaña, la forma (oval o redonda), la disposición (central, terminal o subterminal) y si son exosporas o endosporas tienen interés taxonómico.
Necesitamos cultivos de al menos 48 h, para que la bacteria haya tenido tiempo suficiente para formar esporas.

APARATAJE:

-Microscopio.

MATERIALES:

-Asa de siembra desechable.
- Mechero de alcohol.
- Portaobjetos.
- Pinzas de madera.
- Agua destilada.
- SSF.
- Gradillas.
- Cubeta de tinción.
- Papel de filtro.
- Antorcha (asa de siembra y algodón graso + alcohol).
- Colorantes: verde malaquita 5% y safranina.

PROCEDIMIENTO:

1.EXTENSIÓN -> en primer lugar ponemos una gota de SSF en el porta, cogemos colonia de la placa Petri y frotamos en el porta.
2. DESECACIÓN -> con ayuda del mechero de alcohol secamos muy bien la preparación del portaobbjetos.
3. FIJACIÓN -> flameamos varias veces el portaobjetos.
4. TINCIÓN -> 1'en frío de verde malaquita y 5' a emisión de vapores( se consigue calentando la parte inferior del porta(con el papel de filttro cubriendo la preparación) con la antorcha fabricada ), y lavamos con agua del grifo una vez enfriado y finalmente 2' safranina y lavamos con agua destilada.

RESULTADOS: