MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA 12: PRUEBAS IDENTIFICACIÓN COCOS GRAM NEGATIVOS.

OXIDASA

OBJETIVOS Y FUNDAMENTOS:

Capacidad que tienen algunos microorganismos,aerobios o anaerobios facultativos, de producir el enzima "citocromo oxidasa", que cataliza, en la cadena respiratoria, la transferencia de electrones desde un sustrato orgánico hasta el oxígeno.

MATERIALES:

- Placa de Petri.
- Papel de filtro.
- Asa de siembra.
- Mechero de alcohol.
- Reactivo de Kovacs.

PROCEDIMIENTO:

- Colocar un trozo de papel de filtro en una placa de Petri.
- Agregar 2-3 gotas del reactivo de Kovacs en el centro del papel.
- Extender una colonia, con el asa de siembra, sobre el papel impregnado.

RESULTADOS:

Si la reacción es positiva se observa la aparición de color violeta a los 5-10''.
Oxidasa -

FOTOGRAFÍAS:

FERMENTACIÓN DE AZÚCARES

OBJETIVOS Y FUNDAMENTOS:

A menudo las bacterias anaerobias y anaerobias facultativas fermentan los carbohidratos produciendo ácidos orgánicos y gas los cuales pueden detectarse mediante un indicador de pH y una campana Durham.

MATERIALES:

- Asa de siembra.
- Mechero de alcohol.
- Campana Durham.

PROCEDIMIENTO:

- Inocular la bacteria en un medio líquido que contenga una pequeña cantidad de peptona, un indicador de pH y una fuente de carbono fermentable.
- Introducir una campana Durham dentro del tubo.
- Incubar 24h a 37ºC.

RESULTADO:

- La producción de ácido vira el medio de color rojo a amarillo.
- La formación de gas se detecta por acumulación de éste en la campana Durhan.
Fermenta carbohidratos.
-Produce ácidos.
- No forma gas.

FOTOGRAFÍAS:

BETA GALACTOSIDASA (ONPG)

OBJETIVOS Y FUNDAMENTOS:

Determina la capacidad que presentan algunas bacterias, que poseen el enzima beta-galactosidasa, para fermentar la lactosa originando glucosa y galactosa.

MATERIALES:

- Tubo ensayo 5 ml y tapón.

- SSF.

- Asa de siembra.

- Pinzas metálicas.

- Discos de ONPG.

- Mechero de alcohol.

PROCEDIMIENTO:

- Depositar un disco de ONPG en un tubo de ensayo que contiene 1 ml de SSF estéril.

- Inocular una colonia con el asa de siembra.

- Incubar 24 h a 37ºC.

RESULTADOS: